实验介绍

剧烈疼痛常难以控制，严重影响患者生活质量。在疼痛研究的近几十年历史中，科学家一直致力于复制更能反映人类疼痛特性的动物模型。这些动物模型部分再现了人类所表现的疼痛、痛觉过敏以及由轻触、压觉等引起的疼痛反应等症状。这些模型的成功复制是研究疼痛产生机制的基础，为人类认识疼痛机制及筛选更好的治疗药物提供了有效工具。

冷觉过敏症的检测是疼痛行为研究中一个非常重要的方法。冷热板测痛仪是一款多功能的热疼痛阈值测试仪，适用于大鼠、小鼠麻醉、镇痛、神经性疼痛的药物筛选，为相关镇痛药物研究服务。实验中，将小鼠置于稳定在冰上、温度为4°C的圆形有机玻璃板上五分钟。当小鼠接触冷板时，会抬起爪子，抬爪次数反映动物对冷刺激的反应程度，通过记录动物的反应时间（跳跃或舔脚行为）可评估它们对热或冷的疼痛反应。目前用于检测疼痛的冷板设备主要为冷热板测痛仪，可根据温度变化调节实现冷刺激或热刺激。

设备说明

镇痛仪基于金属板设计，该板可加热至55°C并冷却至-2°C（环境温度需在20°C至25°C之间）。电子恒温器维持板温稳定，前面板数显温度计显示板面温度。冷热板设计简单且升温降温迅速（从环境温度降至4°C，或升至阈值温度用时不超过10分钟；从4°C升至55°C需5分钟）。温度测量精度为0.5°C。前面板计时器显示动物反应所需秒数。

装置由一个置于250 × 280 × 150 (mm) 带盖有机玻璃立方体箱内的圆柱形测试室组成。盖子固定在测试室顶部防止小鼠跳出。测试室底部的小孔用于排出融化的冰水。固定好冰块后，将一个2毫米厚的圆形有机玻璃板紧密放置在测试室的冰块上。使用表面温度传感器检测板面温度，传感器置于板面后可在显示器读取温度。冰块放置5分钟后，板面温度稳定在4°C。

为测试小鼠冷感觉过敏症，将小鼠放在冰板上，计算小鼠抬爪的频率和时间以进行评估。
 

为评估此方法，常用于测试三种小鼠疼痛模型：福尔马林试验、慢性收缩性损伤（CCI）等。当冷热板测痛仪板面温度设定为4℃时，对坐骨神经病理性疼痛模型动物，受试药物能明显改变其在冷板上的抬足时间和次数。当板面温度设定为55℃时，能准确测量动物的生理性痛阈高低，以此判定受试药物的镇痛类型和效果。为评估小鼠对有害冷的反应，将其置于有机玻璃室的冷热板仪器上（板温0°C），录像3分钟。

三、程序说明

冷板试验中，啮齿动物爪子的收缩被视为刺激反应。该试验有助于了解冷异感和痛觉减退。冷板温度设定为5°C。截止潜伏期为30秒。将大鼠放入冷板装置到后爪抬起反应之间的时间记录为反应时间（大鼠组测量第一次收回后爪的反应）。在暴露于CCI的大鼠组中，受伤的后爪在所有情况下最先做出反应。冷板温度保持5°C，截止潜伏期30秒。将大鼠放在冷板上，记录其抬起后爪的时间。在每种情况下，受伤的爪子总是最先反应。动物带离笼子以进行疼痛刺激测试。

四、程序步骤

1. 建议先让动物适应测试室环境。
2. 使用前，用认可的消毒剂清洁冷盘表面。
3. 将冷盘表面冷却至实验所需温度范围。
4. 将动物放入测试仪器。动物一般活动受限，但未受物理束缚。
5. 记录动物出现爪缩、抖动或跳跃（较少见）等痛觉反应的潜伏期。一旦观察到明确反应，立即移走动物。
6. 如果在20秒内未观察到反应，则移走动物。
7. 动物在无拘束状态下进行测试，能准确反映痛觉行为。可对行为潜伏期及固定时间内的舔足次数进行准确统计。