多重qPCR核心特点、优势及应用领域的介绍_abio生物试剂品牌网

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告别“单打独斗”,多重qPCR支持“团队作战”
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什么是多重qPCR
多重qPCR是实时荧光定量PCR技术的一种高级形式。它是在同一个PCR反应体系中,同时使用多对引物和多个特异性的探针(或染料),针对两个或两个以上的不同目标核酸序列(靶基因)进行扩增和实时定量检测。简单来说,就是“一管反应,多个目标”。

 
多重qPCR核心特点与优势
  1. 并行检测:同时检测多个靶标。
  2. 节省样本:对珍贵或有限的样本(如临床活检、稀有细胞)特别有价值。
  3. 节省试剂与时间:比进行多个单重qPCR反应显著减少试剂消耗和操作时间。
  4. 节省成本:降低了每个靶标检测的成本。
  5. 减少误差:所有靶标在完全相同的反应条件下进行扩增,减少了管间差异带来的误差,结果可比性更高。
  6. 提高通量:非常适合高通量筛查和需要同时检测多个指标的应用(如病原体分型、多基因表达分析、SNP分型等)。
  7. 内参共检:可以轻松地将内参基因与目标基因放在同一个反应中进行检测,提高定量的准确性。

多重qPCR主要应用领域
  • 病原体检测与分型(如同时检测多种病毒、细菌或耐药基因)
  • 基因表达分析(同时检测多个功能相关基因或通路基因)
  • 基因分型(如SNP、插入/缺失检测)
  • 转基因检测(同时检测多个转基因元件或品系特异性标记
  • 拷贝数变异分析
  • 食品安全检测(同时检测多种过敏原或污染物)

多重qPCR主要类型
多重qPCR主要根据所使用的化学发光方法来分类,主要包括:
  • 水解探针法:最常用,高特异高灵敏,多重能力取决于通道数。
  • 染料法:成本最低,但特异性低,多重能力有限(依赖Tm差异)。
  • 分子信标法:背景低,对点突变鉴别强,设计复杂。
  • ScorPIons法:速度快灵敏度高,设计最复杂成本最高。
在实际应用中,基于水解探针的多重qPCR因其良好的平衡性(特异性、灵敏度、多重能力、相对成熟度)而成为绝对的主流。染料法主要用于靶标少且Tm差异明显、对成本敏感的非关键应用。分子信标和Scorpions则在特定需求场景下使用。

QX系列实时荧光定量PCR系统
杰莱美QX系列实时荧光定量PCR系统最大可实现单管6重荧光检测,6通道96孔检测时间不超过5秒,实现对珍贵样本最大限度的利用和数据挖掘。另外搭配业界领先的荧光定量PCR数据处理软件,QX系列将荧光信号处理、专业的数据计算方法、严谨的统计学分析功能整合为一站式解决方案,从核酸到蛋白研究,满足探索各种科学问题的实验需要,重新定义了科研级荧光定量PCR系统。

   
基于杰莱美QX系列实时荧光定量PCR系统,设计了六重qPCR实验,首先通过执行DNA系列稀释(最低浓度为100cp/uL),对6个靶标基因进行梯度检测,绘制出如下的标准曲线。如图所示,每个靶标的反应都显示出极好的扩增效率,E值在接近100%的范围内,且R2值均大于0.99,接近1。这些结果证明了QX系列实时荧光定量PCR系统具有卓越的检测性能,支持6靶标的精准检测,可为您的实验提供最大限度的灵活性。
 




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