如何为不同应用场景选用不同灵敏度的支原体检测试剂盒!_abio生物试剂品牌网

abiopp10个月前未命名86
支原体检测是细胞培养和相关生物制品的重要质控方案,但不同的应用场景需要选用不同的检测试剂盒。试剂盒的选择主要考虑几个因素:

1、质控的等级要求;
等级要求最高的,是细胞与基因治疗产品的最终检测,成品检测或放行检。可选高灵敏度检测试剂盒,需要极高的检测灵敏度,至少达到10CFU/每剂,特异性要求也最高,必须无假阳性,假阴性。相对应地,样本需要经过复杂的前处理过程,包括支原体富集,核酸抽提,然后采用高灵敏度QPCR检测试剂(扩增45个循环,阳性阈值定为40个循环)。高灵敏试剂对整个实验操作对环境和操作过程要求高,稍有疏漏,会出现假阳性或扩增曲线翘尾。

对于细胞和基因治疗产品中间研发过程的质控,等级要求可以适当放宽,灵敏度在100-10CFU是可以被接受的,并且很多情况下为了简化操作,往往采取直扩的方案,即直接在QPCR体系中加入细胞上清或悬浮液进行检测(扩增40个循环,阳性阈值定为35个循环);若想进一步提高灵敏度可采取浓缩裂解的
方案,即细胞上清通过高速离心后去掉上清,加入裂解液处理。

对于科研细胞房使用,可选用科研版直扩检测法,扩增35个循环,阳性阈值定为32个循环,实验对环境无菌要求不高,相应地,灵敏度要求也不高,直接上清加样,不需要对样本特殊处理,灵敏度在1000-100CFU,如若要节约成本,可采取混和样本检测。

2、经济成本;
高灵敏QPCR检测试剂盒,需要进行样本抽提,灵敏度高,需要配备荧光定量pcr仪,成本高;直扩QPCR检测试剂盒,不需要抽提和特殊样本前处理,灵敏度中等,成本中等;科研版支原体检测试剂盒,可混样检测,成本较低。

3、操作的复杂程度
高灵敏QPCR检测法需要浓缩,抽提样本,可批量操作,操作难易程度中等,对实验人员有一定的要求,操作时间4-8小时;直扩QPCR检测法和科研版直扩法,操作比较简单,只需要加样上机即可,操作时间1-3小时即可。

结合以上因素,总结如下:
高灵敏度:高灵敏支原体QPCR检测试剂盒(成品放行检,提高速率,但成本中等)。
快速便捷:直扩支原体QPCR检测试剂盒(平衡速度与成本,设备要求低,适合中间质控环节)。
成本至上:科研版支原体检测试剂盒(节约成本,适合科研细胞实验室)。
{"weibo":"1","wechat":"1","qq":"1","qzone":"1","douban":"1","linkedin":"1","diandian":"1","facebook":"1","twitter":"1","google":"1"}

相关文章

Phylumtech设备揭示生物除草剂的作用机制,助力农业科研变革_abio生物试剂品牌网

Phylumtech设备揭示生物除草剂的作用机制,助力农业科研变革_abio生物试剂品牌网

还在为杂草肆虐,化学除草剂污染环境发愁?今天给大家分享一项超厉害的农业科研成果,主角就是 Phylumtech 设备,它在新型生物除草剂研究里堪称 “幕后英-雄”,给农业可持续发展带来新希望! 传统...

MicroFab Inkjet喷墨打印在助力柔性电致变色器件制备中的应用_abio生物试剂品牌网

MicroFab Inkjet喷墨打印在助力柔性电致变色器件制备中的应用_abio生物试剂品牌网

东华大学先进纤维材料全国重点实验室张耀鹏教授团队通过使用MicroFab Jetlab 4高精度喷墨打印系统将具有良好分散性的聚苯胺(PANI)纳米片沉积在织物上,构筑了一种具有优异的电导性...

中药养心定悸胶囊通过抑制钠通道和L型钙通道缓解心律失常的研究_abio生物试剂品牌网

中药养心定悸胶囊通过抑制钠通道和L型钙通道缓解心律失常的研究_abio生物试剂品牌网

研究背景: 心律失常是全球性健康大问题,死亡率高。室性心律失常(VAs)是其中一类,症状多样,常见于缺血性心脏病患者和处于重大压力下的人群,严重时可致心源性猝死。 Vaughan-Willia...

猪细小病毒抗体制备、特性及其在猪细小病毒病防控中的应用_abio生物试剂品牌网

猪细小病毒抗体制备、特性及其在猪细小病毒病防控中的应用_abio生物试剂品牌网

猪细小病毒病(Porcine Parvovirus Infection,PPI),又称猪繁殖障碍病,是由猪细小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)引起的一种猪的传染病。该病在全球范围内...

利用3D打印口腔溶解膜注射寨卡病毒疫苗的研究应用_abio生物试剂品牌网

利用3D打印口腔溶解膜注射寨卡病毒疫苗的研究应用_abio生物试剂品牌网

寨卡病毒 (ZIKV) 属于黄病毒科,早期 ZIKV 免疫是预防小脑畸形和吉兰-巴利综合征(GBS) 等并发症的首要任务。 与传统的疫苗接种方法不同,...

涡度相关通量介绍与数据处理方法_abio生物试剂品牌网

涡度相关通量介绍与数据处理方法_abio生物试剂品牌网

1         什么是涡度相关通量( Eddy Covariance Flux )? 能量流动与物质循环是地圈、生物圈与大气圈相互作用的重要纽带,...