超分辨率显微镜技术解析:以更多细节研究亚细胞结构与动态_abio生物试剂品牌网

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以空前的细节探索生命的真实本质    

超分辨率光学显微镜使您能够以更多的细节研究亚细胞结构和动态。 使用 LIGHTNING 技术时,共聚焦图像采集的空间分辨率提高了一倍,而使用 STED 时可以在纳米尺度上提供洞察。了解更多关于徕卡显微系统超分辨率方法的信息,以及它们如何在病毒学、免疫学、神经科学和癌症研究领域推动新发现。
  什么是超分辨率显微镜? 超分辨率显微镜是一种光学成像技术,克服了光的衍射极限,允许以比传统光学显微镜更多的细节可视化亚细胞结构和动态。使用 STED(受激发射损耗)和纳米成像可以实现 30 纳米的分辨率。纳米级分辨率揭示了关于亚细胞结构和相互作用的更多细节信息。 

超分辨率显微镜在病毒学、免疫学、神经科学和癌症研究领域推动了突破性的发现。
用于细胞生物学应用的多彩 TauSTED Xtend 775,要求对多个细胞组分进行纳米级分辨率成像。细胞显示出波形蛋白纤维(AF 594)、肌动蛋白网络(ATTO 647N)和核孔篮(CF 680R)。样本由布里吉特·贝尔格纳、马里亚诺·冈萨雷斯·皮斯菲尔、斯特芬·迪特策尔提供,生物医学中心生物成像核心设施,路德维希-马克西米利安大学,德国慕尼黑。
关于超分辨率
  由于光的衍射极限,“传统”的荧光显微镜技术无法分辨低于 240 纳米的结构。因为生物学并不止步于这个尺度,因此所谓的超分辨率显微镜技术是不可或缺的。 LIGHTNING 和 STED 是两种引人注目的徕卡显微系统超分辨率共聚焦方法,用于以更高的精度展示结构,并揭示无法看到的细节。 

LIGHTNING 检测概念基于自适应去卷积,有效地将横向分辨率提高到 120 纳米。使用 LIGHTNING,您可以探测从微管动态到亚细胞区室结构的样本。 

STED 纳米显微镜将超分辨率提升到一个新的水平,使您能够常规地实现低于 30 纳米的横向分辨率。通过 STED,您可以在体内剖析细胞结构和功能,例如染色质和核孔的重组、神经元结构的微小变化、线粒体和突触囊泡的细胞内运输、病毒颗粒的进入、蛋白质复合物的共定位等。
细菌鞭毛的图像:相关的三色共聚焦-LIGHTNING-STED 成像允许同时使用互补的方法来研究和验证样本。样本由德国柏林洪堡大学的 Marc Erhardt 提供。
  超分辨率显微镜是如何工作的? 超分辨率显微镜可以通过多种方式进行。 

● LIGHTNING 检测概念使超分辨率共聚焦显微镜成为可能。与传统的去卷积技术使用全图像的全局参数集不同,它基于一种自适应去卷积过程,该过程使用体素特定的决策掩模来寻找合适的去卷积参数。 得益于强大的 GPU 计算,LIGHTNING 能够在近实时的情况下同时处理多种颜色。结合共振扫描仪,它还提供了大视场和高帧率。   ● 受激发射损耗(STED)方法与共聚焦技术结合,可实现超分辨率荧光显微术。STED支持多通道成像,并在三维空间内实现各向同性的超分辨率成像。其原理基于:使用激发荧光团的波长照射衍射极限光斑,同时以引发退激发或受激发射的波长照射环形区域。此设计使仅有亚衍射区域处于激发态,从而实现比传统衍射极限光学显微术更高的分辨率。 徕卡显微系统的独特TauSTED功能可在提升STED分辨率的同时,消除不必要的背景噪声。


FluoCells 小鼠肠道切片。杯状细胞的粘液,灰色,Alexa Fluor 350 WGA。细胞核,绿色,SYTOX Green。丝状肌动蛋白,红色,Alexa Fluor 568 phalloidin。
超分辨率显微镜与电子显微镜有什么区别?

超分辨率显微镜利用可见光光学来可视化样本,而电子显微镜则利用电子束对样本进行成像。这两种技术各有优缺点,但只有超分辨率显微镜提供了对活体标本进行实验标记多个分子靶标以赋予其特定对比度以及方便样本准备的优势。

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