方案摘要：本方案聚焦 PIpetty 电动移液器在登革热血清检测（Mac - ELISA）中的应用。Mac - ELISA 检测登革热血清时，对移液精度与效率要求较高。Pipetty 电动移液器凭借独特优势脱颖而出，其内置温度传感器，能依据温度自动校正分配量，规避手温干扰，保障移液精度。连续分液功能可将设定液量多次等量排出，极大提升 96 孔板等加样效率。且该移液器轻巧便携，操作方式多样，可显著减轻实验人员负担，助力登革热血清检测高效、精准开展，有力推动相关检测工作的顺利进行 。
 
方案详情：
一、实验原理
      根据抗原抗体特异性结合的原理，利用抗人μ链单克隆抗体捕获待检测血清中的IgM，再加入特异性抗原和相应酶标单克隆抗体，加底物显色。显色程度与特异性IgM抗体含量呈正相关。
二、‌ 实验准备
1、设配和材料
① Pipetty电动移液器MSIC01-02-1000及配套吸头。
② 洗板机。
③ 酶标仪。
④ 恒温温箱或水浴箱(37℃±2℃)。
⑤ 10mL 吸管。
⑥ 稀释血清用的试管。
⑦ 吸水纸。
 
2、试剂和材料
① 登革病毒 IgM 抗体捕捉 ELISA 诊断试剂盒。
② 蒸馏水或去离子水。
③ TMB（四甲基联苯胺）。
④ 病人标本。
 
三、实验步骤
1、使用Pipetty电动移液器，设置混匀模式，将阴、阳性对照血清，临界值较准血清和待检血清按照试验需求稀释成1：100；吸取所需量的纯化登革病毒抗原和等体积辣根过氧化物酶标记单克隆抗体转移至干净的试管中，自动混匀后置室温作用 1h；
 
2、使用一键混匀功能，混合好标记单克隆抗体和抗原后，在 10min 内各吸取100μL稀释好的病人标本和对照血清至测试板上相应的微孔中，37℃作用 1h；
 
3、用Pipetty弃掉血清后，用洗涤液重复洗涤6次，吸水纸上扣干，使用连续分液功能，分别加100μL上述作用好的登革病毒抗原和酶标单克隆抗体复合物，37℃作用 1h；
4、弃登革病毒抗原和酶标单克降抗体复合物，用洗涤液重复洗涤6次，吸水纸上扣干，使用连续分液功能，每孔加入100 μL的 TMB（四甲基联苯胺），室温作用 10min 充分显现蓝色后，每孔加入 100 μL的终止液，一键混匀；
5、在 30min 内于450nm 波长处读取每孔的吸光度。
 
四、试验结果
判断标准为：在NC/C0<1且PC/C0>1的情况下，若S/C0<0.9，则结果为阴性，若S/C0>1.1，则结果为阳性，若S/C0=0.9~1.1，则标本需重做。
注：S为待检血清的吸光度；NC为阴性对照血清的吸光度；PC为阳性对照血清的吸光度；C0为临界较准血清的吸光度平均值。