光学系统分辨率的决定因素_abio生物试剂品牌网

abiopp10个月前未命名131
无论是光学领域从业者,还是在工作场景使用到光学成像设备的研 究人员,一定会遇到一个问题: 我使用的或者调研的光学系统分辨率到底是由什么决定?有人说是物镜的数值孔径决定,有人会提到像素值,还有人眼成像和显示成像的关系是什么?下面,我会完整和系统的讲讲决定光学系统分辨率的因素以及它们之间的关系。

光学系统有很多种,它们的结构和成像原理都有所不同,如望远镜、显微镜、各种成像仪,所以我们先确定一个相对经典的成像系统:光学显微镜,来展开讲解。 

我们先简单的回顾一下光学的一些基础知识,光具有波粒二相性质,所以光是一种电磁波,我们下面所介绍的主要定义为波段在390nm—770nm可见光波段的常规显微镜。
那么为什么我们人眼无法直接看到很小的细节呢?因为理论上,我们眼球两边的肌肉伸缩可以帮助眼睛对20厘米到无限远处的物体聚焦(图1.1),当我们想分辨一个物体的细节时,需要一定的视角才行(图1.2),所以我们无法看清玻片上样品的细节,因为它们太小了,使得你的视角非常小,以致无法分辨它们。但你也无法靠近样品来增加视角,因为太近无法聚焦(图1.3)。
所以,我们需要一个媒介,来放大样品的像,这就是显微镜。显微镜可以说是各种棱镜的组合(图2.1)。
图2.1简单光学放大成像原理

在讨论光学分辨率由什么决定前,我们先需要理解什么是光学分辨率,以及为什么存在光学分辨率极限。 瑞利判据: 在成像光学系统中,分辨本领是衡量分开相邻两个物点的像的能力。由于衍射,系统所成的像不再是理想的几何点像,而是有一定大小的光斑(艾里斑),当两个物点过于靠近,其像斑重叠在一起,就可能分辨不出是两个物点的像。即光学系统中存在着一个分辨极限,这个分辨极限通常采用瑞利提出的判据:当一个艾里斑的中心与另一个艾里斑的第一级暗环重合时,刚好能分辨出是两个像。

瑞利距离 为能分辨两个艾利班的最小距离,这个距离有一个公式:Rayleigh distance =0.61λ/N.A。其中λ光学系统中光源的波长,N.A为物镜的数值孔径。 
所以,我们继续展开,一般光源的波长是恒定的,显微镜常用的LED白光取550nm,那么决定性的变量就是物镜的
数值孔径N.A 。N.A值物镜的物理特性,它由物镜的直径 (D) 和工作距离 (WD) 决定,N.A也有其公式:N.A=n*sin a/2。(其中n为光工作介质的折射率,a为光进出透镜时最大锥角)。
讲到这里,我们就可以理解为什么光学分辨率有极限值,它由物镜N.A决定,N.A越大,分辨率越高;N.A由工作介质折射率和透镜最大锥角决定,折射率一般为空气固定1(部分介质能稍微提高折射率:如油镜),那么就只能通过让物镜更靠近样品和增大物镜的口径这两方面提高最大锥角α,又因为公式N.A =n*sin a/2中sin函数有最大值为1,所以就假设物镜已经做到理想状态α角使N.A取到最大值1(空气介质),那么瑞利距离(分辨率)0.61λ/N.A就算得最小值为0.61x550/1=335nm,该值为白光下显微镜的极限分辨率。 

接下来我们继续讨论一个问题:现代显微镜通常搭配摄像头连接电脑成像,那么在显示器上的成像分辨率还是不是光学分辨率,和通常衡量图像分辨率的参数:
像素 又是什么关系? 

在解答这个问题之前,我们简单讲解一下摄像头的工作原理:简单来讲,摄像头是把平时到人眼的光信号转化为显示器上成像的电信号,如果光信号成像的分辨率是瑞利距离,那么电信号成像的分辨率就是
像素 ,它们之间的关系是:显示分辨率是摄像头像元尺寸(单个像素尺寸)和采样率直接影响实际可达到的分辨率,它不会超过光学分辨率。像元尺寸限制:若摄像头像元尺寸大于光学分辨率,则无法分辨细节。例如,若光学分辨率为5微米,而像元尺寸为10微米,则实际分辨率受限于摄像头。 奈奎斯特采样定理: 为充分解析目标,像元尺寸需小于线分辨率的1/2。所以搭配足够分辨率的摄像头,才能完全发挥出光学系统本身的分辨能力。


我们总结一下,
光学系统的分辨率主要由衍射极限决定 ,在光学显微镜中,衍射极限由物镜的数值孔径决定,在有探测器(摄像头)的光学系统中,最终成像分辨率由光学分辨率和摄像头的像元尺寸共同决定,摄像头并不能提高光学系统的分辨率。
 

相关文章

大负载摇床赋能生物制药,解锁高效无菌混匀新方案_abio生物试剂品牌网

大负载摇床赋能生物制药,解锁高效无菌混匀新方案_abio生物试剂品牌网

在生物制药领域,工艺的一致性和无污染保障是确保产品质量和安全性的关键所在。GMP(良好生产规范)及相关法规对制药生产过程中的设备提出了严格要求,以防止交叉污染、保证产品质量的稳定性和一致性。...

KLF4 和 AMPK 在内皮细胞中脉动切应力抑制糖酵解过程中的作用_abio生物试剂品牌网

KLF4 和 AMPK 在内皮细胞中脉动切应力抑制糖酵解过程中的作用_abio生物试剂品牌网

Roles of KLF4 and AMPK in the inhibition of glycolysis by pulsatile shear stress in endothelial cell...

一种整合DDA-PRM-dMRM的新方案实现高风险HCPs的定性定量分析_abio生物试剂品牌网

一种整合DDA-PRM-dMRM的新方案实现高风险HCPs的定性定量分析_abio生物试剂品牌网

宿主细胞蛋白(HCPs)是生物治疗药物中与工艺相关的关键杂质,会影响药物的稳定性和安全性。治疗性蛋白与残留HCPs成分的动态范围极大,往往大于5个数量级,导致高风险HCPs检测更加困难。LC-MS/M...

冷热板实验的测试方法_abio生物试剂品牌网

冷热板实验的测试方法_abio生物试剂品牌网

实验介绍 剧烈疼痛常难以控制,严重影响患者生活质量。在疼痛研究的近几十年历史中,科学家一直致力于复制更能反映人类疼痛特性的动物模型。这些动物模型部分再现了人类所表现的疼痛、痛觉过敏以及由轻触、压觉等...

支原体的生物学特点和检测方法_abio生物试剂品牌网

支原体的生物学特点和检测方法_abio生物试剂品牌网

支原体的生物学特点 支原体(Mycoplasma)支原体是一种原核细胞病原体,大小是介于细菌和病毒之间,其细胞结构和形体大小与病毒以及细菌等病原体有明显的差异,且能够在体外独立存活,是目前所知能独...

体外诊断试剂里的“防冻液”,没它你的检测结果可能全崩!_abio生物试剂品牌网

体外诊断试剂里的“防冻液”,没它你的检测结果可能全崩!_abio生物试剂品牌网

凌晨三点,实验室警报骤响——价值十万的试剂盒突然集体“罢工”,标准曲线乱成心电图。工程师冲进冷库才找到真凶:AP稳定剂漏加了。这个藏在说明书角落的添加剂,竟是体外诊断试剂的“生命保险”。今天我们就来聊...