LTXFECT线性PEI 40000高效低毒科研转染试剂说明书_abio生物试剂品牌网

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基因功能研究、重组蛋白生产和细胞治疗领域,转染效率与细胞活性始终是科研人员面临的"双刃剑"难题。中乔新舟自主研发的LTXFECT线性 PEI 40000,凭借其创新的分子设计与卓越性能,正为全球生命科学研究提供更优解决方案。
 
如下是线性PEI 40000化学结构式:

 
核心优势
 

√ 超80%平均转染效率(HEK293/CHO等常见细胞系验证)
√ 低细胞毒性保障实验稳定性
√ 任选包装形式:粉末速溶配方-即配即用和即用型液体包装
√ 兼容多种细胞系(含HEK293T/Sf9/HepG2等)
√ 无丙酰基残留干扰

为何选择中乔新舟LTXFECT线性PEI 40000?
 

相较于传统分枝化结构,LTXFECT线性PEI 40000采用独特线性聚合技术
• 高密度阳离子:通过精准控制40000分子量,形成强效核酸结合位点
• 智能复合物:带负电核酸与阳离子聚合物自组装,穿透效率提升30%
生物相容性优化:线性结构减少细胞膜损伤,存活率提升至95%+
 
【突破性技术对比】
 

与常规PEI相比,LTXFECT线性PEI 40000实现三大革新:
1.溶解革新:直接水溶 vs 弱酸预处理+pH回调(节省15分钟操作时间)
2.纯度升级:完全脱落结构 vs 4-11%丙酰基残留(避免DNA结合位点屏蔽)
3.效能飞跃:转染效率提升20%+(经CHO-K1细胞系等平行实验验证)
 
多场景应用验证
 

• 悬浮/贴壁细胞通用:HEK293系列稳转株构建周期缩短至72小时
• 难转染细胞突破:Hela细胞转染成功率突破85%临界值
• 昆虫细胞适配:Sf9细胞蛋白表达量提升2.1倍(对比脂质体法)
 
【专家级操作指南
 

三步完成转染:
1.配制:1mg/ml水溶液,涡旋10秒即完全溶解
2.复合:DNA: LTXFECT线性 PEI 40000=1:3(推荐初始比例)
3.转染:6孔板体系仅需5分钟孵育时间
 
【操作步骤】
 

试剂准备:

1g粉剂定容在1L纯水中,需用NaOH/HCL调节PH到6.90-7.10,一次性无菌滤器过滤,4℃备用。

瞬时转染方法:

一. 接种细胞, 转染前一天,用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到 70~80%。 

二. 准备DNA-PEI 40000复合物,DNA、PEI 40000试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。用中乔新舟转染专用减血清培养基(货号:ZQ-300-ST)稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI 40000试剂。每1μg DNA 需用2-5μL线性PEI 40000转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI 40000转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25 min以形成DNA-PEI 40000复合物。 

三. 转染细胞,直接向每个孔中加入DNA-PEI 40000复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI 40000复合物。转染3 h后,添加1/2体积的包含30%血清的生长培养基。 

四.孵育细胞和分析结果,在CO2培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后最快7 h即可检测到转入基因的表达。请自行确定最适合检测时间。
 
稳定转染方法:

一.接种细胞,转染前一天,用胰酶消化细胞并计数。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。 

二.准备DNA-PEI 40000复合物:DNA、PEI 40000试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。用中乔新舟转染专用减血清培养基(货号:ZQ-300-ST)稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μg DNA 需用2-5μL线性PEI 40000转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI 40000转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25 min以形成DNA-PEI 40000复合物。

三.转染细胞,直接向每个孔中加入DNA-PEI 40000复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI 40000复合物。转染3 h后,添加1/2体积的包含30%血清的生长培养基。 

四.孵育细胞和分析结果:在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后最快7h即可检测到转入基因的表达。

五.转染24 h后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释10倍以上),在CO2培养箱中37℃孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约1~2周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

以下是293T细胞转染前后的细胞对比图:

 
产品列表:

 


中乔新舟为每批次PEI 40000提供:
ISO9001质量认证
细胞转染效率验证报告
专属技术顾问支持
让LTXFECT线性 PEI 40000成为您实验室的"转染加速器"!
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