来源：瑞孚迪生命科学
作者：芝士拉满

在肿瘤治疗领域，抗体药物偶联物（ADC）正成为精准医疗的明星选手，目前全球已有15款ADC药物获批，全球在研ADC药物数量庞大，中国药企研发管线占全球40%以上。ADC药物凭借精准治疗优势和持续的技术创新，未来将成为全球抗肿瘤药物市场的重要支柱。

ADC药物的核心在于其独特的三部曲设计，抗体负责靶向识别肿瘤细胞表面抗原。连接子连接抗体与细胞毒性药物。细胞毒素，如微管抑制剂（MMAE）、DNA损伤剂（DM1）等在细胞内释放，直接杀伤肿瘤细胞。

ADC药物的作用机制可概括为以下四个步骤：
靶向结合：抗体与肿瘤细胞表面抗原结合，形成ADC-抗原复合物
内吞作用：ADC复合物通过受体介导的内吞作用被内化
药物释放：内体与溶酶体融合，酸性环境下ADC降解并释放细胞毒素
细胞凋亡：药物诱导肿瘤细胞死亡，同时可通过旁观者效应影响邻近细胞

图片来源：Iris-biotech

在ADC药物研发中，内吞作用至关重要。内吞作用不仅影响药物的释放效率，还决定了药物是否能够发挥旁观者效应，以及是否会导致剂量限制毒性。此外，内吞作用的效率和途径与ADC的疗效密切相关，因此在药物研发早期阶段需要筛选出具有最佳内吞特性的ADC分子。

瑞孚迪（Revvity）推出全新方案pHSense™ pH敏感型Eu探针用于量化ADC内吞
pHSense™ Eu探针是瑞孚迪近期推出的新一代镧系铕穴状化合物，专为内化研究而开发。它具有独特的二维pH敏感性，当pH值为中性/碱性时，其620nm发射光信号非常低，而当pH值下降至酸性时，620nm发射光信号强度显著上升。除此之外，620nm发射光的寿命也会随pH值变化而改变，趋势表现为随着pH值下降，620nm发射光寿命延长，因此可实现时间分辨荧光（TRF)检测。凭借独特的二维pH灵敏度特性，pHSense™ Eu探针可实现高灵敏、高检测窗口的ADC抗体内吞检测。

适用于贴壁细胞和悬浮细胞的精简型内吞作用检测流程
瑞孚迪提供即用型pHSense™ Eu Fab anti human/mouse IgG，可特异性识别人或小鼠IgG抗体的Fc片段，实现抗体的标记。标记过程无需额外的分离纯化步骤，只需15-30分钟即可完成标记，可实现方便灵活的抗体内化高通量筛选。

整个实验流程仅需四步，且只需在细胞培养板操作即可。以贴壁细胞为示例，步骤为：细胞过夜培养-弃培养基上清-加ADC&Fab-Eu预混物-读数，全程无需洗涤，支持实时监测。同时，独家基于酶标仪读取数值的检测形式，大大提高了实验的效率和通量，且支持96&384-wells通量。

卓越的信噪比，提供更可靠的药理学数据，适用于抗体以及ADC内化
左图使用2nM的pHSense™ Eu Fab anti-Human lgG试剂标记后的Trastuzumab抗体，加入过表达HER2的BT-474细胞中，37°C孵育，使用酶标仪动态检测620nm发射光，随着时间可清晰观察到特异性抗体内化信号，而Irrelevant IgG1和Fab Only对照组随着时间推移信号保持不变，且始终表现出极低的背景信号。

右图使用pHSense™ Eu Fab anti-Human lgG试剂标记不同浓度的Enfortumab-vedontin ADC，加入表达了Nectin-4的SUM190-PT细胞中，37°C孵育5小时后用酶标仪检测620nm发射光，检测出的EC50值与已发表文献一致。

上海玮驰仪器有限公司为revvity瑞孚迪代理商。