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Ribo-seq技术原理与应用方向_abio生物试剂品牌网

abiopp5个月前 (04-10)技术18
Ribo-seq技术原理 翻译(Translation)是基因表达的关键步骤,是指信使RNA(mRNA)携带的遗传信息被核糖体解码并转化为特定氨基酸序列的过程。蛋白质翻译的调控是高度精准、多层次、动态化的过程。

在全基因组水平上,转录与翻译经常存在显著差异。通过转录组测序鉴定的上调表达基因中,只有其中20%在蛋白水平上调。

核糖体印迹测序(Ribosome profiling, Ribo-seq),能够精细解析细胞内的翻译过程。Ribo-seq的技术核心是识别与核糖体结合的RNA,以及正在被翻译的约30个核苷酸。对核糖体结合的RNA片段进行测序,能够精确记录核糖体在翻译过程中的位置。将转录组与Ribo-seq数据联合分析,可以计算量化蛋白质的合成速率。通过Ribo-seq分析,能够鉴定新型的uORF、microPeptide、发现新颖的翻译调控机制以及能够被翻译的lncRNA。

Ribo-seq已经应用于解析生长发育与分化、疾病发生机制和抗逆分子机制的研究。

应用方向
Ribo-seq应用于研究转录本的翻译活性、鉴定翻译起始位点、密码子使用、ORF位置和mRNA的翻译调控机制。

Ribo-seq技术已经广泛应用在动物、植物和微生物的研究中,用于揭示生长发育、形态建成、疾病发生、逆境胁迫响应的调控机制。总之,Ribo-seq能从基因组水平检测正在翻译的mRNA序列信息,揭示核糖体在mRNA上的位置和翻译活性,并帮助解析翻译调控机制。

蓝景科信优势
  • 实验周期快、质量高、结果稳定可靠。
  • 丰富的物种经验。
实验流程
    分析内容
标准生信分析
(1)原始数据过滤与测序质量评估
(2)比对去除rRNA、tRNA、sRNA等
(3)Reads长度分布统计与长度过滤
(4)比对参考基因组
(5)测序饱和度分析
(6)ORF在基因组上的分布统计与分类
(7)三碱基节律分析
(8)翻译基因统计与表达量分析
(9)样本关系分析
(10)组间差异翻译基因分析
(11)差异翻译基因的GO和KEGG功能富集分析
(12)ORF的翻译潜力分析
(13)ORF的特征分析
Ribo-seq与RNA-seq的联合分析
(1)翻译效率计算
(2)Ribo-seq与RNA-seq的相关性分析
(3)翻译效率与转录水平的关联分析 Clean reads长度统计             Reads在参考基因组不同区域的分布 P-Site分析 ORF分析  
ORF翻译潜力分析   ORF特征鉴定
 uORF对annotated ORF的影响     Ribo-seq与转录组数据联合分析

我们的优势

● 实验周期快、质量高、结果稳定可靠。

● 丰富的物种经验。

已做物种
人,小鼠,猪,家蚕,果蝇,拟南芥,烟草,毛白杨,胡杨,甘薯,甲藻等

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