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Pipetty电动移液器在细菌内毒素检查法中的应用_abio生物试剂品牌网

abiopp5个月前 (07-29)技术76

 
 
  • 取内毒素标准品5EU/ml一支,并加入1000μl检查用水。
  • 在漩涡混合器上混匀15min。
  • 计算根据鲎试剂的灵敏度λ(如0.25EU/ml),用检查用水将内毒素标准溶液稀释成2λ。
 
 
 
(二)制备 供试品 溶液
1.计算有效稀释倍数(MVD)
MVD=cL/λ
L为样品的细菌内毒素限值(如葡萄糖注射液为0.5EU/ml)
c为供试品的浓度(如葡萄糖注射液为1.0ml/ml)
λ为鲎试剂的灵敏度(设为0.25EU/0.1ml)
MVD=1.0*0.5/0.25=2(倍)
2.取供试品500μl,加入检测用水500μl,混合均匀备用。
(三)制备 样品阳性对照溶液
1.取供试品溶液250μl,加入250μl检查用水混合均匀,制成样品的2倍稀释液。2.将上述稀释液与0.5EU/ml的内毒素溶液500μl混匀备用。
 
  • 鲎试剂的准备
准备鲎试剂(0.25EU/0.1ml)8支,并向每支鲎试剂中加入100μl检查用水混匀备用。
 
  • 加样
 根据下表加样。
加样表2
 
(六)检测
加样完毕后轻轻混匀,用封口膜密封试管口,置于37℃恒温器中保温1h观察结果。
 
(七)结果判定
将安瓿轻轻取出,缓缓倒转180°,若管内形成凝胶并且凝胶不变型、不滑落者为阳性。相反,则为阴性。当阴性对照组均为阴性,供试品阳性对照组均为阳性,阳性对照组均为阳性,试验有效。
 
 

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