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Avi-Tag高精度生物素化标记技术的原理、优势及分子互作研究中的应用_abio生物试剂品牌网

abiopp7个月前 (05-27)技术78

蛋白标签
蛋白质作为生命活动的核心执行者,其结构与功能异常与绝大多数疾病的发生发展密切相关。然而,针对特定蛋白质的深入研究一直面临着重大技术挑战。在这一背景下,蛋白标签技术(Protein tag)应运而生,为蛋白质研究提供了革命性的解决方案。

传统蛋白质检测主要依赖免疫分析方法,包括蛋白质印迹(Western Blot)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫共沉淀(IP)等。这些方法虽然应用广泛,但存在明显局限性:每次研究新靶蛋白都需要制备特异性抗体,不仅操作流程繁琐,而且成本高昂。蛋白标签技术的出现彻底改变了这一局面,通过将通用标签与目标蛋白融合表达,实现了蛋白质检测的标准化和便捷化。

蛋白标签技术是指通过基因工程手段,将具有特定功能的多肽序列、蛋白质结构域或完整蛋白与目标蛋白进行融合表达的技术体系。该技术不仅能实现目标蛋白的高效检测,还可用于蛋白质纯化、定位追踪等多种研究应用。目前,融合标签技术已成为现代蛋白质研究中不可或缺的重要工具,大大提升了科研工作的效率和可靠性。

Avi Tag
生物素连接酶(Biotin ligase)是由大肠杆菌BirA基因编码的双功能蛋白质,具有独特的分子识别特性。该酶不仅能特异性识别蛋白质分子中的特定氨基酸序列,催化生物素与靶蛋白的共价结合,还可作为转录阻遏蛋白调控生物素合成相关操纵子的表达。

Avi Tag标记技术正是基于这一原理发展而来的蛋白质标记方法。该技术利用生物素连接酶的酶促反应特性,实现对目标蛋白的特异性生物素标记。作为一种多功能短肽标签,Avi Tag可广泛应用于蛋白质固定化、纯化分离及显影检测等多个领域。

从技术原理来看,Avi Tag通过在目标蛋白的N端或C端融合一段由15个氨基酸组成的短肽标签,该标签可被生物素连接酶BirA特异性识别并催化生物素共价连接。这种定点标记方式不仅实现了蛋白质的特异性生物素化,更重要的是显著提高了亲和素-生物素系统的结合特异性和亲和力。目前,该技术已在蛋白质纯化、蛋白质相互作用筛选、荧光标记等研究领域展现出重要应用价值

Avi Tag的技术优势
无论在体外或者体内,几乎所有的蛋白都可以在一个独特的Avi Tag位点轻易且有效地被生物素化;
生物素化是通过酶和底物的反应来实现,反应条件相当温和而且标记的专一性极高;
生物素AviTag只有15个氨基酸,对蛋白空间结构的影响非常小。

产品信息



参考文献
1. Li T, CAI H, Zhao Y, et al. Uncovering a conserved vulnerability site in SARS-CoV-2 by a human antibody. EMBO Mol Med. 2021;13(12):e14544. doi:10.15252/emmm.202114544
2. Reja SI, Minoshima M, Hori Y, Kikuchi K. Near-infrared fluorescent probes: a next-generation tool for protein-labeling applications. Chem Sci. 2020;12(10):3437-3447. Published 2020 Oct 23. doi:10.1039/d0sc04792a
3. Song X, Bian H, Wang C, Hu M, Li N, Xiao Y. Development and applications of a near-infrared dye-benzylguanine conjugate to specifically label SNAP-tagged proteins. Org Biomol Chem. 2017;15(38):8091-8101. doi:10.1039/c7ob01698k
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