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生物发光成像技术中三大生物发光体系的应用适配性介绍_abio生物试剂品牌网

abiopp4个月前 (05-15)技术13
生物发光成像(BLI)技术在疾病模型研究中具有重要价值,但其性能高度依赖于酶-底物体系的特性。本文基于实验数据,对比 FLuc/D-荧光素钾盐体系、AkaLuc/Akalumine盐酸盐体系、 NanoLuc/HFFz 体系这三种体系的表层、深层组织穿透性及病灶定位能力,为不同实验场景提供选型依据。

体外灵敏度与检测极限
在体外梯度稀释实验中, NanoLuc/HFFz 体系在 10 个细胞时仍可检测到稳定信号,而 FLuc/D-荧光素钾盐体系、AkaLuc/Akalumine 盐酸盐体系在此条件下信号均低于检测阈值。

FLuc/D-荧光素钾盐体系:
传统高负荷检测
适用场景:体外大规模细胞实验(如药物筛选、肿瘤球生长监测)短期浅表组织成像(如皮下移植瘤体积追踪)。

AkaLuc/Akalumine盐酸盐体系:
穿透性增强的中等灵敏度系统

核心价值:改良底物结构提升组织穿透性,适用于中深层组织动态监测(如肌肉内炎症模型、淋巴结转移)。

NanoLuc/HFFz体系:
单细胞级检测的革命性突破

技术优势:支持极低细胞量研究(如循环肿瘤细胞捕获、早期微转移灶定位),低底物负荷减少代谢毒性,适合长期实验(如慢性疾病模型)。

  FLuc/D-荧光素钾盐体系、 AkaLuc/Akalumine盐酸盐体系、 NanoLuc/HFFz体系在细胞水平上的发光检测
图使用博鹭腾 Aniview 全光谱动物活体成像系统拍摄

在体内不同位置比较实验
●  FLuc/D-荧光素钾盐体系
受限于组织穿透力,仅推荐用于浅表或高细胞密度区域(如皮下肿瘤短期监测)。
●  AkaLuc/Akalumine 盐酸盐体系
在表层及深层组织(如大脑、肺部)中信号最强,其底物分子量小、脂溶性高的特性可能优化了血脑屏障穿透。凭借其穿透性优势适合急性期监测,可快速捕捉病灶(如脑转移瘤短期治疗响应)。
●  NanoLuc/HFFz 体系
虽然信号强度比 AkaLuc/Akalumine 盐酸盐体系的低,但以极低浓度实现有效检测,并且也能够进行血脑屏障穿透,其以低毒性实现持续信号,在长期毒性敏感实验(如脑转移慢性模型)中更具安全性优势。

    FLuc/D-荧光素钾盐体系、 AkaLuc/Akalumine盐酸盐体系、 NanoLuc/HFFz体系在体内发光检测图
图使用博鹭腾 Aniview 全光谱动物活体成像系统拍摄

HFFz 发光底物体外极限细胞数量信号对比

  B16F10-NanoLuc细胞-HFFz底物发光检测图
图使用博鹭腾 Aniview 全光谱动物活体成像系统拍摄
 
B16F10-NanoLuc细胞-HFFz底物发光检测统计图(每个数据均进行三个重复)
 
成本-效益比
本实验中 FLuc/D-荧光素钾盐体系试剂成本最低,但灵敏度局限;NanoLuc/HFFz 体系单次检测成本高于 AkaLuc/Akalumine 盐酸盐体系,但超微检测需求可减少实验动物使用量。
 
多层次技术矩阵
FLuc/D-荧光素钾盐体系、 AkaLuc/Akalumine 盐酸盐体系、 NanoLuc/HFFz 体系形成多层次技术矩阵:
FLuc/D-荧光素钾盐体系凭借成本与稳定性,仍是高通量筛选的“基础支柱”;
AkaLuc/Akalumine 盐酸盐体系填补深层组织实时成像空白,成为急性期研究的“透视眼”;
NanoLuc/HFFz 体系突破灵敏度极限,为精准医学提供单细胞级“显微镜”。
研究者需根据目标组织的解剖特性、检测持续性和毒性耐受阈值进行准确匹配,必要时通过多体系联用实现实验设计的最优化。
例如用 AkaLuc/Akalumine 盐酸盐体系定位转移灶后,切换 NanoLuc/HFFz 体系进行长期微残留监测,实现实验设计的精细化升级。

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