当前位置:首页 > 技术 > 正文内容

如何为不同应用场景选用不同灵敏度的支原体检测试剂盒!_abio生物试剂品牌网

abiopp4个月前 (05-12)技术11
支原体检测是细胞培养和相关生物制品的重要质控方案,但不同的应用场景需要选用不同的检测试剂盒。试剂盒的选择主要考虑几个因素:

1、质控的等级要求;
等级要求最高的,是细胞与基因治疗产品的最终检测,成品检测或放行检。可选高灵敏度检测试剂盒,需要极高的检测灵敏度,至少达到10CFU/每剂,特异性要求也最高,必须无假阳性,假阴性。相对应地,样本需要经过复杂的前处理过程,包括支原体富集,核酸抽提,然后采用高灵敏度QPCR检测试剂(扩增45个循环,阳性阈值定为40个循环)。高灵敏试剂对整个实验操作对环境和操作过程要求高,稍有疏漏,会出现假阳性或扩增曲线翘尾。

对于细胞和基因治疗产品中间研发过程的质控,等级要求可以适当放宽,灵敏度在100-10CFU是可以被接受的,并且很多情况下为了简化操作,往往采取直扩的方案,即直接在QPCR体系中加入细胞上清或悬浮液进行检测(扩增40个循环,阳性阈值定为35个循环);若想进一步提高灵敏度可采取浓缩裂解的
方案,即细胞上清通过高速离心后去掉上清,加入裂解液处理。

对于科研细胞房使用,可选用科研版直扩检测法,扩增35个循环,阳性阈值定为32个循环,实验对环境无菌要求不高,相应地,灵敏度要求也不高,直接上清加样,不需要对样本特殊处理,灵敏度在1000-100CFU,如若要节约成本,可采取混和样本检测。

2、经济成本;
高灵敏QPCR检测试剂盒,需要进行样本抽提,灵敏度高,需要配备荧光定量pcr仪,成本高;直扩QPCR检测试剂盒,不需要抽提和特殊样本前处理,灵敏度中等,成本中等;科研版支原体检测试剂盒,可混样检测,成本较低。

3、操作的复杂程度
高灵敏QPCR检测法需要浓缩,抽提样本,可批量操作,操作难易程度中等,对实验人员有一定的要求,操作时间4-8小时;直扩QPCR检测法和科研版直扩法,操作比较简单,只需要加样上机即可,操作时间1-3小时即可。

结合以上因素,总结如下:
高灵敏度:高灵敏支原体QPCR检测试剂盒(成品放行检,提高速率,但成本中等)。
快速便捷:直扩支原体QPCR检测试剂盒(平衡速度与成本,设备要求低,适合中间质控环节)。
成本至上:科研版支原体检测试剂盒(节约成本,适合科研细胞实验室)。

本站“ABIO生物试剂品牌网”图片文字来自互联网

如果有侵权请联系微信: nanhu9181 处理,感谢~

相关文章

GelMA水凝胶微球用于再生医学研究的相关应用_abio生物试剂品牌网

GelMA水凝胶微球用于再生医学研究的相关应用_abio生物试剂品牌网

通过微流控乳液法、静电微滴等技术制备出的GelMA微球 不仅保留了GelMA优异的生物相容性和生物活性,而且可作为单独的细胞培养单元或组装成多孔支架或模拟仿生微环境,进而应用于细胞3D培养、药物递...

纳微快速纳米药物制备系统在制备脂质mRNA-LNP递送载体中的新应用_abio生物试剂品牌网

纳微快速纳米药物制备系统在制备脂质mRNA-LNP递送载体中的新应用_abio生物试剂品牌网

近日,浙江大学刘帅课题组使用 纳微仪器Nanowetech的NWDPS快速纳米药物制备系统制备单组分阳离子脂质mRNA,静脉给药后靶向脾脏T细胞。   NWDPS快速纳米药...

小鼠原代小肠类器官培养实验步骤及应用指南_abio生物试剂品牌网

小鼠原代小肠类器官培养实验步骤及应用指南_abio生物试剂品牌网

应用指南 | 小鼠原代小肠类器官培养实验   #应用指南# 2009 年,Hans Clevers 及其团队利用 Lgr5+ 肠干细胞在体外培养出了三维小肠类器官结构。这种结...

血管生成实验步骤及常见问题解析_abio生物试剂品牌网

血管生成实验步骤及常见问题解析_abio生物试剂品牌网

血管生成实验怎么做?NEST来胶你!   “1971 年,Judah Folkman 教授提出 “肿瘤生长和转移依赖于血管新生” 理论,认为新血管的形成对于肿瘤生长和转移至关重要。”...

病毒疫苗检测与质量控制中,MetaSPR技术如何确保疫苗高效安全?_abio生物试剂品牌网

病毒疫苗检测与质量控制中,MetaSPR技术如何确保疫苗高效安全?_abio生物试剂品牌网

在与病毒的斗争中,我们如何确保疫苗的安全性与有效性?如何为公众健康、畜牧业、宠物健康提供坚实保障?答案在于严格的病毒疫苗检测与质量控制。MetaSPR技术以其高精度、高灵敏度的监测能力,成为了这一环节...