实验室血清的质检要点、在各细胞系的验证及其使用的难点总结_abio生物试剂品牌网

abiopp1年前未命名138

你以为细胞培养皿里只是"躺平"?错!它们可是妥妥的"美食家"。血清——来自血液的黄金液体,就是细胞的满汉全席!

Section.01
血清: 细胞的“五星级外卖”

血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后,分离出的淡黄色透明液体。


血清核心作用有哪些?

首先,血清可谓细胞食堂!氨基酸、葡萄糖、维生素、脂质、微量元素……营养直接拉满,细胞干饭不摆烂!

血清还是贴壁神器!纤维连接蛋白、层粘连蛋白等——贴壁细胞的“强力胶”,防止细胞“躺平变圆” (拒绝 996,但贴壁必须稳)。

当然,血清还是实验 Buff:病毒培养、杂交瘤存活、冻存保护……血清在手,科研不愁!

细胞的“米其林厨房”如何炼成?

血清生产流程:血液采集 → 凝固分离 → 三级过滤 → 质检分装 → 冷链配送。

图 1. 血清生产流程图。

Section.02
质检内幕:
血清届的“魔鬼面试”

你以为血清随便就能上岗?它可是要过五关斩六将!涵盖质量监控、微生物验证、生化检测等诸多环节。当然,实践出真知!经过客户实践验证的血清才是好血清~


血清的质量检测

血清的客户验证

表 1. 文献研究中的血清使用及培养参考。

实验验证 1:趋化实验

实验细胞株:THP -1 cells
培养基:RPMI 1640 +10% FBS +1% P/S
细胞密度:1.5×105 个/孔
培养时间:4 h
实验结果:Mouse MCP-1 有促进 THP-1 细胞正向定向迁移,且呈现出浓度依赖性。

图 2. 探究 Mouse MCP-1 对 THP -1 趋化的影响。

 
实验验证 2:细胞生长

实验细胞株:SH-SY5Y cells
培养基:DMEM/F12 培养基 +15% FBS +1% P/S
细胞密度:4.5×103 个/孔
培养时间:48 h
实验结果:Human Neurofascin 可以促进 SH-SY5Y 细胞突触延伸。

图 3. 探究 Human Neurofascin 对 SH-SY5Y 细胞突触的影响。

 
实验验证 3:划痕实验

实验细胞株:AGS cells
培养基:Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S
细胞密度:2×106 个/孔
培养时间:24 h
实验结果:Human GRIK 抑制 AGS 细胞的损伤后的“愈合”作用。

图 4. 探究 Human GRIK2 对 AGS 细胞运动的影响。

 
实验验证 4:细胞增殖实验

实验细胞株:Balb/3T3 cells
培养基:DMEM +10% FBS
细胞密度:3×103 个/孔
培养时间:48 h
检测试剂:CCK8
实验结果:Human Amphiregulin 可以促进 Balb/3T3 细胞的增殖,ED50=14.39 ng/mL。

图 5. 探究 Human Amphiregulin 对 Balb/3T3 细胞增殖的影响。

 
实验验证 5:Transwell 迁移实验

实验细胞株:PC-3 cells
培养基:Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S
细胞密度:7×104 个/孔
培养时间:24 h
实验结果:Human Androgen receptor 抑制 PC-3 细胞的迁移,随着浓度增加,迁移呈现负趋势。

图 6. 探究 Androgen receptor 对 PC-3 细胞迁移的影响。

 
MCE 血清在各细胞系中的验证

 
Section.03
灵魂拷问:
血清使用的终极难题


1. 血清应该如何保存?

经常使用的血清分装后保存在 -20℃ 即可,长期保存建议保存在 -80℃。反复冻融会导致血清有沉淀析出,建议将大规格血清分装成单次使用规格后保存,按需取用。


低温保存,拒绝反复冻融!!!

2. 血清应该如何解冻?

解冻时需要从低温中取出后,放置于 2-8℃ 冰箱中缓慢解冻,在溶解过程中避免剧烈震荡,可隔一段时间,缓慢晃动,混合溶解成分并加速溶解过程。不可将血清直接从低温拿到室温/25-37℃ 环境中溶解,巨大的温度变化容易使血清产生絮状沉淀,且长时间放置在室温/25-37℃ 环境中,容易使血清中活性物质发生变化,影响细胞生长等。


缓慢升温,拒绝暴力摇晃!!!

3. 血清溶解后的沉淀是什么?

血清中出现的沉淀物质可能包括纤维蛋白 (絮状沉淀)、脂蛋白、冷凝集素、玻连蛋白、胎球蛋白、磷酸钙与草酸钙 (显微镜下小黑点沉淀) 及胆固醇等。


4. 血清在使用之前需要再次过滤?

血清在生产过程中严格执行三级过滤 (0.1 μm),标准的无菌操作,不建议在使用前再次过滤,再次过滤可能会导致血清中营养物质减少。


5. 血清在使用前是否需要热灭活?

热灭活是指在 56℃,30 min 处理已经完全解冻的血清,热灭菌可以使血清中的补体去活化。热灭活血清对于细胞生长只有微小的促进作用或者没有作用,但通常会导致细胞生长速度慢,血清中 沉淀物显著增多等问题。非必要,不建议热灭活。


6. 我要替换我现在使用的血清,应该怎么操作呢?

细胞对于日常培养条件具有适应性,贸然打破会导致它不适应新的生活环境,需要先进行驯化。建议复苏细胞使用原品牌血清,传代 1-2 代,细胞状态稳定后,新血清:原血清=1:3 进行第一次换液,新血清逐代提高至 50%,75%,100%,过程注意监控细胞状态,稳定情况下传代,且需要保持较高的传代密度。


Tips:文末彩蛋~细胞培养的哲学

细胞如顶流明星,血清是独家营养师——科研圈没有“凑合”的容身之地,只有“硬核”的生存法则!

 
Section.04
小结

点击关注,解锁更多血清及细胞培养秘籍,让你的细胞稳坐 C 位,Paper 轻松登顶!


参考文献:
[1] Yang J,et al. VSTM2L protects prostate cancer cells agAInst ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 2025 Jan 29;16(1):1160.
[2] Han H, et al. Therapeutic potential of monomethyl fumarate and aluminum ion combination in alleviating inflammation and oxidative stress in psoriasis. Redox Biol. 2025 Feb;79:103482. 

相关文章

树��等动物能量代谢方面研究的案例分享_abio生物试剂品牌网

树��等动物能量代谢方面研究的案例分享_abio生物试剂品牌网

      云南师范大学朱万龙、王政昆教授团队自2019年从易科泰购买了便携式多功能动物能量代谢测量、Thermo-RGB红外热成像与可见光成像动物行为观测技术装置以来,...

WMicrotracker助力抗寄生虫药物筛选,发现新型抗蠕虫化合物_abio生物试剂品牌网

WMicrotracker助力抗寄生虫药物筛选,发现新型抗蠕虫化合物_abio生物试剂品牌网

近日,加州大学圣地亚哥分校的研究团队利用WMicroTracker技术,成功筛选出多种具有潜在抗寄生虫活性的小分子化合物。这一研究成果发表在bioRxiv上,标志着抗寄生虫药物研发领域的重要进展。...

脂多糖 (LPS) 在炎症造模中的应用_abio生物试剂品牌网

脂多糖 (LPS) 在炎症造模中的应用_abio生物试剂品牌网

LPS,它与炎症反应有着千丝万缕的联系......  LPS 何方神圣?在体内如何诱发炎症反应?  如何选择 LPS 构建"合拍"的炎症疾病模型?  ...

纳他霉素单克隆抗体的制备、性能及应用_abio生物试剂品牌网

纳他霉素单克隆抗体的制备、性能及应用_abio生物试剂品牌网

纳他霉素(Natamycin,NTM)是一种多烯大环内酯类抗真菌剂,广泛用于食品防腐(如奶酪、烘焙食品)和医药领域(治疗真菌感染),但其过量使用可能导致过敏反应或残留风险,因此需对其含量进行严格监控。...

TMEM119-CreERT2在神经科学研究中的应用及相关小鼠模型的介绍_abio生物试剂品牌网

TMEM119-CreERT2在神经科学研究中的应用及相关小鼠模型的介绍_abio生物试剂品牌网

作为大脑的“免疫哨兵”,小胶质细胞既能在神经发育时修剪突触、塑造神经网络,又能在炎症反应中清除病原体和细胞碎片,还能在血管损伤、神经退行性疾病等多种场景中快速响应扰动 [1-2]。要深入探究...

基于光谱反射指数与叶绿素荧光参数的作物光合活性评估方法_abio生物试剂品牌网

基于光谱反射指数与叶绿素荧光参数的作物光合活性评估方法_abio生物试剂品牌网

易科泰植物表型成像技术: 精准解码干旱胁迫下作物光合响应机制,引领智慧农业新未来       在全球气候变化日益严峻的背景下,干旱胁迫已经成为限制作物产量的主...