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体外受精-胚胎移植一站解决！

一、小鼠体外受精-胚胎移植概念

体外受精（In Vitro Fertilization，IVF）是指将经体外获得的成熟小鼠卵母细胞与已在体外完成获能的精子混合，使其受精并形成受精卵（合子）的全过程。

不过，由于哺乳动物胚胎在体外条件下通常只能发育到囊胚等早期阶段，若要获得存活后代，必须将其通过胚胎移植（Embryo Transfer，ET）植入假孕母鼠子宫内完成妊娠。因此，在实验动物学中，体外受精与胚胎移植常合称为 IVF-ET 技术。

二、实验前准备

1、材料与试剂

● 实验动物：

供体鼠：SPF级超排卵雌鼠（3-5周龄，品系匹配）

精子来源：生育能力良好的雄鼠（通常8-16周龄），或冻存精子

受体鼠：SPF级假孕母鼠（与供体鼠同步发情）

● 核心试剂：

超数排卵激素：PMSG（孕马血清促性腺激素）、hCG（人绒毛膜促性腺激素）

受精液、获能液：小鼠精子获能液TYH、小鼠体外受精液HTF

● 设备： 体视显微镜、CO₂培养箱、超净工作台

2、环境要求

● SPF级操作间：超净工作台，定期消毒灭菌。

● 温度控制：操作台温度恒定25℃，培养基预温至37℃。

三、操作流程

①　3-5周龄雌鼠腹腔注射PMSG。

②　46-48小时后再注射hCG。

③　14-16小时后先取雄鼠的附睾尾，将精子收集至获能皿培养1小时，激活精子。

④　然后摘取雌鼠的输卵管，收集卵母细胞，移入受精滴。

⑤　接着将完成获能的精子加入受精滴，进行体外受精。

⑥　4-6小时后，将受精的卵母细胞转移至清洗滴中，清洗3遍，放回培养箱中过夜培养。

⑦　第2天挑选优质的2细胞胚胎，进行胚胎移植。

⑧　等待19天左右，乳鼠出生。

四、IVF-ET技术的应用价值

1、生物净化和提高微生物等级

2、克服特殊品系繁殖障碍

3、高效利用宝贵的雄鼠资源

4、拯救珍贵品系和复苏冷冻品系

5、快速获得大量年龄高度一致的后代

6、缩短品系繁殖周期和降低实验成本

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